蛋白质电泳

分子标记在物种识别中的应用

在最近的VHS调查中,在Breaks州际公园,188bet亚洲以前有两种粘乎乎的蝾螈在那里出现,,戊二醛(北方泥泞的蝾螈)和P.肯塔基(坎伯兰高原蝾螈)。分离这两个物种的形态特征是相对的。普莱索顿肯塔基有点小,下巴更轻,背部斑点越来越小P.粘蛋白.如果你只有一只蝾螈,而不是一个群体(包括这两个群体),为了比较的目的,很难判断出这些特征。

图1。 普莱索顿肯塔基和谷胱甘肽
来自弗吉尼亚州狄更森县。

你能确定吗?上面照片中的哪个个体是哪个物种?詹姆斯·彼得兰卡在他优秀的书《美国和加拿大的蝾螈》中说188bet亚洲利用蛋白质的电泳比较进行鉴定是最可靠的。”理查德海顿最初描述了不同种类的粘蝾螈的基础上的蛋白质电泳。蛋白质电泳是一种根据蛋白质的总电荷来分离同一蛋白质的各种形式的技术。蛋白质由氨基酸链组成。有些氨基酸带正电荷,其他是消极的,而其他人则是中立的。当考虑到蛋白质中的所有氨基酸时,正负电荷加在一起,蛋白质的总电荷为正电荷或负电荷。不同物种的细胞将有一套共同的蛋白质用于正常的生化反应。然而,该蛋白质的氨基酸序列的微小差异可导致不同物种具有该蛋白质的稍微不同的形式(称为同工酶),该蛋白质的总电荷略有不同。在电泳中,来自不同动物的蛋白质被放置在多孔凝胶中,并将电荷金宝博亚洲真人施加到该凝胶上。大多数蛋白质带负电荷,并通过该凝胶迁移到带正电的阳极。如果一个同工酶的负电荷稍大,它的迁移速度会更快,随着时间的推移,距离越来越远,比带有较少负电荷的同工酶。

图2。 GOT的淀粉凝胶电泳
三种粘糊糊的蝾螈。

谷氨酸-草酰乙酸转氨酶(GOT或AAT)是一种将氨基从氨基酸转移到有机酸的酶,它与有机酸形成不同的氨基酸。它在氨基酸序列(和电荷)上与弗吉尼亚州四个粘蝾螈中的三个不同,使之成为物种鉴定的诊断工具。得到P.肯塔基在净电荷中负电荷最大,迁移最快最远,然后P.圆柱形的,然后是P的同工酶。谷朊病毒和P。最慢的氯布赖尼。如果你有一个以上的组织样本,这些可以被放置在凝胶中,施加的电场,蛋白质可以通过凝胶迁移几个小时。然后电流被关闭,凝胶被化学染色,在凝胶中留下蓝色标记,在那里蛋白质在迁移后就结束了。然后就可以根据蛋白质迁移的速度来判断动物是什么物种了。下面的图1是GOT的凝胶染色,包括4P.肯塔基,三P.粘蛋白,一个P.圆柱形的.知道同工酶P.肯塔基迁移最快,并在凝胶的顶部显示出4的蝾螈是P.肯塔基.知道同工酶P.圆柱形的有一个中间迁移表明有一个物种。因为该动物是从一个只有该物种存在的地区采集的,所以这是一个有用的参考样本,因为它的身份是已知的。终于知道了同工酶P.粘蛋白最慢,最接近凝胶底部显示凝胶上有三种。该州东金宝博亚洲真人南角没有包括任何动物,因此没有可能188bet亚洲P.绿苔属包括在凝胶上。如果你只有一只动物,不可能知道它是什么物种。你必须在相同的凝胶上运行参考样品。然而,如果你有这些样品,或者如果你知道你的动物群包括这两个物种,金宝博亚洲真人与传统的形态学标记相比,基于分子标记识别动物可能更容易。金宝博亚洲真人观察蛋白质的迁移速度是快还是慢可能比判断下巴是暗还是浅容易,如果斑点较大或较小。显然,你需要实验室和设备来进行电泳,大多数个人都没有这个,但大多数大学都有这些资源。既然我已经鉴定了这些组织样本,我有参考样品,我可以从冰箱里取出,如果我需要识别另一个粘乎乎乎的蝾螈,我就用它。

分子标记在鉴别不同物种上有很大的实用价值。在这种情况下,蛋白质电泳用于确认在Breaks州际公园调查期间收集到两种粘蝾螈。188bet亚洲确定哪些动物代表了哪些物种。金宝博亚洲真人这里使用了蛋白质,但是DNA本身也可以用类似的方式来鉴定物种,因为它们通常有独特的基因。法医生物学家利用DNA电泳证明组织样本来自受保护和濒临灭绝的物种,以阻止此类动物的非法贩运。金宝博亚洲真人

Paul Sattler博士学位
自由大学
生物学系
1971大学大道
LynchburgVA 24501
邮箱:psattler@liberty.edu

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